virolÓGIA
Virológiai laboratóriumunk egy szakértőkből és tapasztalt laboratóriumi technikusokból álló csapat, akik együtt dolgoznak a vírusok izolálásán, azonosításán és autogén vakcinák előállításán különböző állati vírusok számára. A diagnosztikai elemzéseken kívül csapatunk képes speciális in vitro tesztek tervezésére is, amelyek segítenek új termékek kifejlesztésében vagy a meglévő termékek aktivitásának tesztelésében. Ehhez az embrionált tojások mellett több primer sejt vagy folyamatos sejtvonal (például MDCK, Vero, LMH, MA-104) is alkalmazható. Számos célvírus áll rendelkezésre, amelyeket kutatásaink során felhasználunk (lásd: 1. táblázat). Átfogó létesítményünk lehetővé teszi különböző vizsgálatok végzését, például sejtkultúra, PCR, qPCR, új generációs szekvenálás és ELISA módszerekkel, így biztosítva, hogy minden igényét egy helyen elégíthessük ki.
Az alábbi Vírusok vizsgálata végezhető el
Az alábbiakban az in vitro vizsgálatokhoz elérhető vírusok listája található (nem teljes körű).
Table 1. List of viruses. Recent fields and prototype strains
Vizsgálati képességek
Az alábbiakban bemutatunk néhány olyan vizsgálatot, amelyeket laboratóriumunkban sikeresen kifejlesztettünk.
Citotoxicitási vizsgálat
A fizikai és kémiai anyagok toxicitást okozhatnak a sejteken. A tenyésztett sejteken végzett in vitro életképességi és citotoxicitási tesztek széles körben alkalmazott módszerek vegyi anyagok citotoxicitásának vizsgálatára, illetve gyógyszerek szűrésére. Az értékelés az MTT (3-[4,5-dimetil-tiazol-2-il]-2,5-difenil-tetrazólium-bromid) teszten alapul, amely az életképes sejtek általi redukcióját méri, és spektrofotometriásan mérhető lila formazánkristályok keletkeznek. Az anyagok különböző koncentrációi 96 lyukú lemezformátumban tesztelhetők a célsejteken. Az 50%-os citotoxicitási koncentráció (CC50) azt a koncentrációt jelenti, amely 50%-kal csökkenti a sejtek életképességét. A minták lehetnek gyógyszerjelöltek, vírusellenes szerek, toxinok vagy takarmány-adalékanyagok.
Vírusellenes vizsgálat
Ez a teszt értékeli az anyag képességét a vírus replikációjának vagy termelésének gátlására sejttenyészetekben. A vizsgálat során a sejteket különböző koncentrációjú vizsgálandó anyagokkal fertőzik meg, majd a sejteket és a sejttenyészetek felülúszóit különböző időpontokban gyűjtik, miután több vírusreplikációs ciklus lezajlott. A teszt során az anyag különböző kezelési és szállítási módjai is értékelhetők.
50%-os szövettenyészet fertőző dózisú (TCID50) végponthígítás
A TCID50 azt jelenti, hogy mekkora vírusmennyiség szükséges ahhoz, hogy a sejttenyészetben lévő sejtek 50%-át elpusztítsa. A vizsgálat során különböző hígítású vírusmintákat oltunk egy olyan sejtvonalba, amelyet a vírus képes megfertőzni. Az oltott sejteket néhány napig inkubáljuk, majd fénymikroszkóppal megfigyeljük, hogy a sejtekben látható-e a vírus okozta károsodás. A vizsgálat során a vírus koncentrációját Reed és Muench módszerével vagy plakkképző egységek számolásával határozzuk meg.
Hemagglutinációs gátlási (HI) vizsgálat (influenzára vagy más hemagglutináló vírusokra)
A HI vizsgálat alapja, hogy az influenza vírus hemagglutinációját gátolják a vírus elleni antitestek. Az influenzavírus hemagglutinálja a vörösvérsejteket (RBC) a vírus hemagglutinin (HA) fehérjéje segítségével, amely a vörösvértestek felszínén lévő sziálsav receptorokhoz kötődik. Ez a folyamat a hemagglutináció, amely során a vörösvérsejtek összekapcsolódnak, és rácsot alkotnak. Ha a vizsgálat során influenza elleni antitesteket tartalmazó szérumot adunk a vírushoz, mielőtt hozzáadnánk a vörösvérsejteket, az antitestek a vírushoz kötődnek, és megakadályozzák a hemagglutinációt. A hemagglutinációt leginkább gátló szérum hígítását HI-titernek nevezzük.
Mikroneutralizációs vagy vírussemlegesítési vizsgálat
Ezt a tesztet annak meghatározására végezzük, hogy van-e jelen funkcionális antitest a vírusfertőzés megelőzésére. Az előhígított antitesteket (vagy a vakcinázott állatok szérumát) először egy ideig inkubáljuk a célvírussal vagy toxinnal. Ezt követően a vírus-antitest komplexet permisszív sejtvonalba oltjuk. Több órás (vagy napos) inkubálás után fénymikroszkóppal ellenőrizzük, hogy kialakult-e citopátiás hatás (CPE). Ha a vírus vagy toxin nem okoz sejtkárosodást, akkor a sejt életképességét MTT vizsgálattal mérjük.
